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正丁醇層的應該怎么分

正丁醇部位的分離一向是分離工作中的難點,但由于其出新率遠高于小極性部位,所以還是值得下一番功夫的。
一般來說,正丁醇部位往往含有單糖、二糖等小分子糖,多種酚類化合物,以及苷類化合物,極性較大,在硅膠柱上吸附較多,成點性差,分離效果不好。因此,一般說來,對于正丁醇部位可采取以下方法:
1. 大孔樹脂柱分段。 水溶后上樣,依次用水,30%、60%、95%乙醇溶液洗脫,分別合并、收集。一般說來目標化合物多在60%段,水,30%段多為一些水溶性單糖、二糖及多酚類化合物,可以考慮棄去。而95%部分多和乙酸乙酯部位大極性段重疊,可以乙酸乙酯部位合并處理。
2. 反相硅膠分段。 如果正丁醇部位量不是太大,或者課題組有大反相柱,可以考慮用反相柱砍段。本課題組就有一根500g的反相柱,專門用于砍段,效果比正相柱好了許多。唯一需要提醒注意的是,由于我們一般是用正相硅膠板檢測化合物分離情況,所以反相柱 砍段后往往各組份在硅膠板上看起來比較混亂,不如硅膠柱砍段后那么直觀,一定要小心對比,否則會越分越亂。
3.正相柱分配色譜層析。 如果正丁醇部位量太大,或者課題組沒有大的相柱用來分段,那么可以考慮氯仿:甲醇:水 體系來砍段。我一般用8:2:1、7:3:1以及6.5:3.5:1依次洗脫,效果不會很好,但兩到三次反復上柱后各部分還是可以看得到點的。這時再會反相柱細分,拿十到二十個點應該沒問題的。 人人天天夜夜曰曰狠狠狠_波多野结衣中文字幕久久_国产 亚洲 欧美 另类_赤裸人妻撅起肥白大屁股_中国大陆国产高清aⅴ毛片
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